Spectrophotomètre : dispositif optique permettant de quantifier l'absorption de lumière par un échantillon

Pour l'analyse des pigments, un spectrophotomètre de type ultra violet-visible est adapté.

La figure 68 présente le schéma d'un tel appareil. La lumière polychromatique (blanche) émise à partir d'une lampe (au tunsgtène pour le visible ; au deutérium pour l'ultra-violet) est décomposée en plusieurs raies colorées au travers d'un monochromateur (le plus souvent, c'est un réseau). On choisit une longueur d'onde adaptée au composé à analyser. Le faisceau est divisé en deux parties égales grâce à plusieurs miroirs de telle sorte que chaque demi-faisceau traverse un échantillon ; dans l'exemple, l'un d'eux est éclairé et l'autre ne l'est pas (témoin). Après chaque échantillon, l'un des deux demi-faisceaux peut être appauvri en photons si l'échantillon en a absorbé. Les photons ayant traversé l'échantillon sont conduits vers un photomultiplicateur qui amplifie alors le signal et le transforme en intensité électrique. Le résultat est visualisé par la différence d'absorption entre échantillon et témoin.

Figure 1.5.12.
Fig.68 : Schéma d'un spectrophotomètre à double faisceaux.

Hall and Rao (1994) Photosynthesis. 5th edition, Cambridge Univ Press, Fig 4.12